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小鼠雜交瘤細(xì)胞;HPRT說明書

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HPRT說明書

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小鼠雜交瘤細(xì)胞;HPRT說明書 詳細(xì)資料

操作流程:
小鼠雜交瘤細(xì)胞;HPRT說明書主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-43),co2孵箱(日本yamato it-6)。
.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
.2. 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~0倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以×05/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用0×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×04。
.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于2個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×00%,計(jì)算貼壁率。 
.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以×04/孔接種于24孔板,每孔加入ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)0d,繪制細(xì)胞生長曲線

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細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞;HPRT說明書
形態(tài)特性 母細(xì)胞樣

生長特性 半貼壁生長

特征特性 該雜交瘤細(xì)胞由湖南遠(yuǎn)泰生物技術(shù)有限公司制備并提交,細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗,可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。

培養(yǎng)條件 RPMI 640 (w/o Hepes) 0%FBS

傳代方法 :3傳代,2-3天傳一代

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測 陰性

STR

同工酶 同工酶鑒定

染色體

主要功能:
()小鼠雜交瘤細(xì)胞;HPRT說明書血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達(dá)鈣通道及ICAM-和VCAM-,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化:
()主動(dòng)脈硬化。
(2)主動(dòng)脈瘤
(3)主動(dòng)脈鈣化。
基本特性:
()小鼠雜交瘤細(xì)胞;HPRT說明書組織來源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
(2)鑒定:肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×05 cells/ml。
(5)肌動(dòng)蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6)不含有HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

運(yùn)輸和保存:
小鼠雜交瘤細(xì)胞;HPRT說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
)mL凍存細(xì)胞懸液裝于.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存?zhèn)€月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
具體操作:
.預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。
2.用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手。
3.正確擺放使用的器械:保證足夠的*作空間,不僅便于*作而且可減少污染。
4.點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太小。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶,放入微波爐內(nèi)高火,8分鐘再次消毒。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液:大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞:注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細(xì)胞。
8.打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。?

莫地平雜質(zhì)Ⅰ CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: 50mg

萊苞迪甙C; 萊苞迪苷C; 瑞鮑迪甙C CAS 63550-99-2 訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%,0mg/支

喹;喹酰胺醇 CAS 23696-28-8 訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/支

異甘草苷; Isoliquiritin CAS 504-8-6 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

;Troxerutin CAS 7085-55-4 訂購|咨詢  規(guī)格: 00mg

橙皮素 CAS 520-33-2 訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

化天竺葵素 CAS 29956-99-8 訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%;0mg

酸黃連堿 CAS 98398-7-8 訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

CAS 338-69-2 訂購|咨詢  規(guī)格: 20mg

臭靈丹二醇 CAS 6032-35-6 訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

羅漢果皂苷ⅢA CAS 8890-42-2 訂購|咨詢  規(guī)格: HPLC≥98%;0mg

阿奇雜質(zhì)J CAS  訂購|咨詢  規(guī)格: 50mg

小鼠雜交瘤細(xì)胞;HPRT說明書Profilin 2  前纖維蛋白2抗體 規(guī)格: 0.mlXAB2/SYF  XAB2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-human IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.ml

Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的羊抗雞IgG 規(guī)格: 0.ml

GRP94/HSP gp96  葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體 規(guī)格: 0.ml

PXMP/ABCD3  過氧化物酶膜蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

FAP/PTPN3  Fas相關(guān)磷酸酶/蛋白磷酸酶非受體型3抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-rat IgG/HRP  辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 規(guī)格: 0.mlUBE2E3  泛素蛋白連接酶E3抗體 規(guī)格: 0.2ml

KLK8  8抗體 規(guī)格: 0.2ml

MAP4K  造祖細(xì)胞激酶抗體 規(guī)格: 0.ml

HA tag  HA tag標(biāo)簽抗體 規(guī)格: 0.ml

ApoB/Apolipoprotein B  載脂蛋白B抗體 規(guī)格: 0.ml

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 小鼠雜交瘤細(xì)胞 HPRT
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