細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

NCI-H460人非小細胞肺癌細胞

商品屬性

商品介紹

種屬來源：人

性別年齡：男性

生長特性：貼壁生長

細胞形態：上皮細胞樣

細胞規格：1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養條件：RPMI1640 +10% fetal bovine serum37 ℃, 5% CO2

凍存條件：90% FBS + 10% DMSO

傳代方法：1:3傳代, 2-3天傳1代

細胞傳代培養操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養瓶放入37℃培養箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養瓶中，補充培養液并搖勻，放置37℃的CO2培養箱進行培養。

（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產品：

大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒 ，英文名： GMCSF ELISA Kit

Mouse Helicobacter pylori IgG (Hp-IgG) ELISA Kit 小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)檢測試劑盒

RatPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit 大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforGAG(Humanglycosaminoglycan)ELISAKit人糖胺聚糖檢測試劑盒

細胞果糖-1,6-二0酸縮酶(ALD)定量檢測試劑盒20次

RatProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit大鼠前列腺素E2(PGE2)檢測試劑盒

NRG1重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽) Protein

NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1 0.5mgNOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1) 合成酶-1(抗原)

SMOC1重組人 SMOC1 蛋白 (His 標簽) Protein

FAM3C Protein Human 重組人 FAM3C / ILEI 蛋白

CES1D Protein Mouse 重組小鼠 CES3 / Carboxylesterase-3 / CES1D 蛋白 (His 標簽)

NOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1 0.5mgNOS-1(bNOS:neuronal NOS:nNOS:Nitric Oxide synthase-1) 合成酶-1(抗原)

FAM3C Protein Human 重組人 FAM3C / ILEI 蛋白

NRG1重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽) Protein

CES1D Protein Mouse 重組小鼠 CES3 / Carboxylesterase-3 / CES1D 蛋白 (His 標簽)

SMOC1重組人 SMOC1 蛋白 (His 標簽) Protein

NCI-H460人非小細胞肺癌細胞小鼠骨堿性0酸酶(BALP)檢測試劑盒

Human growth hormone releasing peptide (GHRP) ELISA Kit 人生長激素釋放多肽(GHRP)檢測試劑盒

Humangasicinhibitorypolypeptide,GIPELISAKit 人胃抑素(GIP)檢測試劑盒 進口分裝

Humanai-ribonucleoproteinAibody,RNP-Ab檢測試劑盒人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)檢測試劑盒

植物細胞原生質體化學轉染試劑盒10次

HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISAKit人壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)檢測試劑盒

小鼠IP-10(mouse IP-10)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠8異前列腺素(mouse 8-iso-PG)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠白三烯B4(mouse LTB4)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠瘦素(mouse Leptin)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝